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        類器官厚樣本成像,徠卡共聚焦系統(tǒng)解決方案

        發(fā)布時(shí)間:2024/4/9      點(diǎn)擊次數(shù):762

        自21世紀(jì)初,隨著干細(xì)胞研究和組織工程的重大突破,類器官及其在顯微成像中的應(yīng)用取得了顯著進(jìn)展。已開發(fā)的多種類器官模型,如大腦、肝臟和腸道類器官,為研究器官發(fā)育、疾病機(jī)制揭示及治療評(píng)估提供了新途徑。同時(shí),類器官成像技術(shù)的發(fā)展極大地促進(jìn)了研究人員對(duì)這些復(fù)雜三維結(jié)構(gòu)細(xì)節(jié)動(dòng)態(tài)模式進(jìn)行觀察的能力。盡管如此,類器官研究仍面臨個(gè)挑戰(zhàn),包括維持樣本活性、確保成像深度分辨率,及處理分析大量數(shù)據(jù)的需求。


        共聚焦顯微鏡物鏡的發(fā)展,特別是用于觀察厚樣本的物鏡,對(duì)匹配樣本和周圍介質(zhì)的折射率至關(guān)重要,否則會(huì)影響成像深度。高數(shù)值孔徑的油浸物鏡雖然提供高分辨率,但當(dāng)用于水樣本時(shí)由于折射率不匹配而面臨限制,導(dǎo)致球面像差。這影響了能夠有效成像的樣本深度,并降低了圖像質(zhì)量。


        為了解決這些挑戰(zhàn),研究人員開始使用甘油作為一種折射率接近生物樣本的介質(zhì),將樣本置于甘油中,并使用甘油物鏡進(jìn)行成像。隨著技術(shù)的進(jìn)步,甘油物鏡的設(shè)計(jì)和性能不斷改進(jìn),成為現(xiàn)代顯微鏡中常見的物鏡類型之一。


        如今,大多數(shù)固定樣本都使用基于甘油的Mowiol、Vectashield或類似混合物進(jìn)行封片。這些介質(zhì)的折射率接近80/20甘油/水混合物的折射率(ne=1.45)。甘油物鏡(介質(zhì)折射率1.46)是在這種介質(zhì)中封裝的樣本的更佳選擇。


        由于折射率匹配,甘油物鏡減少了散射和光損失,在泛的波長(zhǎng)范圍內(nèi)都具有較好的透明度,提高了圖像質(zhì)量和信號(hào)強(qiáng)度,因此可實(shí)現(xiàn)更深的成像深度




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