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        顯微圖庫 | 徠卡拍攝的多色圖像

        更新時(shí)間:2024-09-23      點(diǎn)擊次數(shù):320





        用徠卡顯微系統(tǒng)儀器拍攝的多圖攝像

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        熒光多色顯微技術(shù)是多重成像技術(shù)的一個方面,可在同一實(shí)驗(yàn)中觀察和分析同一樣本中的多種元素--每種元素都標(biāo)記有不同的熒光染料。這不僅能提高實(shí)驗(yàn)效率,還能獲得更可靠、更有意義的結(jié)果,從而了解細(xì)胞和組織內(nèi)的復(fù)雜過程。本圖集展示了使用THUNDER和STELLARIS平臺獲得的標(biāo)有多種熒光探針的樣本圖像。


        使用 STELLARIS 共聚焦

        平臺進(jìn)行多色成像

        STELLARIS共聚焦顯微鏡系列配備了新一代白光激光器(WLL)。搭配Power HyD檢測器,STELLARIS可提供wanquan自由的光譜。您可以根據(jù)自己的研究需要進(jìn)行多色實(shí)驗(yàn),而不受儀器的限制。通過使用TauSense工具集,STELLARIS還可以利用熒光染料/蛋白質(zhì)基于生命周期的特性,為多色成像增加一個新的維度。


        用TauSTED對活細(xì)胞中的細(xì)胞骨架和細(xì)胞

        進(jìn)行成像

        使用STELLARIS STED采集的圖像。

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        TauSTED 775解析了用SiR-tubulin(熒光 - Spyrochrome)標(biāo)記的錯綜復(fù)雜的細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò),以及用CF594(青色 - Biotium)標(biāo)記的運(yùn)輸囊泡。


        內(nèi)吞途徑和線粒體動力學(xué)

        使用STELLARIS STED采集的圖像。

        用MitoView Green標(biāo)記的線粒體。用CellBright NIR750標(biāo)記的膜泡。使用TauSeparation,根據(jù)與囊泡內(nèi)吞成熟相關(guān)的pH值成熟步驟進(jìn)行壽命成分分離,揭示不同的內(nèi)吞步驟。


        用TauSTED對活細(xì)胞中的細(xì)胞骨架和細(xì)胞膜

        進(jìn)行成像

        使用STELLARIS STED采集的圖像。U2OS細(xì)胞上的活細(xì)胞TauSTED,使用了肌動蛋白(SiR-actin,熒光)、微管(SPY555-tubulin,青色)和膜(CF488A偶聯(lián)WGA,綠色)標(biāo)記。SiR和SPY可從Spirochrome購買。CF染料可從Biotium Inc.比例尺:10 微米。

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        用TauSTED對活細(xì)胞中的細(xì)胞骨架和細(xì)胞膜進(jìn)行成像。


        擬南芥(Arabidopsis thaliana)的根-下胚軸交界處

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        擬南芥(Arabidopsis thaliana)的根-下胚軸交界處:肌動蛋白(Lifeact-Venus,Era 等人,植物細(xì)胞生理學(xué),2009年)、葉綠體(內(nèi)源性熒光)和細(xì)胞壁(碘化丙啶)。通過使用基于熒光壽命的信息,可以觀察到肌動蛋白網(wǎng)絡(luò)、細(xì)胞壁和葉綠體的復(fù)雜細(xì)節(jié)。圖片使用TauContrast技術(shù)獲取。樣本由海德堡大學(xué)COS的Melanie Krebs博士提供。


        揭示細(xì)胞骨架和線粒體之間的相互作用

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        用SiR-Actin(657 - 740 納米檢測范圍)、AF750-Tom20(760 - 790 納米)、AF790-Tubulin(810 - 850 納米)標(biāo)記的 Cos-7 細(xì)胞。

        左圖:傳統(tǒng)砷化鎵檢測器所見。
        右圖:配備Power HyD R檢測器的STELLARIS 8所見。光譜結(jié)果(右)顯示了實(shí)驗(yàn)中使用的熒光團(tuán)的激發(fā)光譜(灰色)和發(fā)射光譜(紅色)。
        樣品提供:Jana D?hner 博士和 Urs Ziegler 博士。Urs Ziegler,蘇黎世大學(xué)。


        充分利用活細(xì)胞實(shí)驗(yàn):更少曝光,更多信息

        使用傳統(tǒng)共聚焦顯微鏡對同一樣本中的多個不同熒光標(biāo)簽進(jìn)行成像時(shí),通常需要對每個顏色通道進(jìn)行順序成像,以避免光譜串色而降低圖像質(zhì)量。在動力學(xué)實(shí)驗(yàn)中,這意味著由于獲取每個時(shí)間點(diǎn)所需的時(shí)間增加,您可能會錯過快速的動態(tài)事件。此外,樣品在臺上停留的時(shí)間更長,因此在實(shí)驗(yàn)過程中保持細(xì)胞健康更具挑戰(zhàn)性。下圖是用4種不同的熒光團(tuán)標(biāo)記的活體 HeLa 細(xì)胞拍攝的圖像,用于識別細(xì)胞核、肌動蛋白、微管蛋白和質(zhì)膜。有了STELLARIS,就可以一次性采集所有4個通道的圖像,而不必對細(xì)胞連續(xù)成像4次。

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        TauSTED 775解析了用SiR-tubulin(熒光 - Spyrochrome)標(biāo)記的錯綜復(fù)雜的細(xì)胞骨架網(wǎng)絡(luò),以及用CF594(青色 - Biotium)標(biāo)記的運(yùn)輸囊泡。


        LAS X Navigator--用于實(shí)驗(yàn)的GPS

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        上圖:小鼠胚胎(如第 X 頁所示)的201張拼接圖像的詳細(xì)視圖(單張圖像)。
        (第 X 頁所示)的細(xì)節(jié)圖(單張)。透射光檢測器(TLD)成像,通過488納米、561納米和660納米的激發(fā)波長創(chuàng)建 RGB 疊加圖像。
        488nm、561nm和638nm波長的激發(fā),生成RGB疊加圖。
        底部:與上述相同視場的TauContrast圖像,最大投影展示。


        以 "光速 "探索

        用LIGHTNING對細(xì)胞內(nèi)成分進(jìn)行成像。

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        用STELLARIS 8采集的圖像。
        用AF488(微管,灰色)、SPY555(肌動蛋白,品紅色)、MitoTrackerRed(線粒體內(nèi)腔,綠色)、Atto 647N(TOM 20,線粒體,紅色)和CF770 WGA(膜,青色)標(biāo)記的U2OS細(xì)胞。




        即將開始的活動:


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