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        手把手教你用THUNDER——24孔板高內(nèi)涵掃描

        更新時(shí)間:2020-07-24      點(diǎn)擊次數(shù):2478

        高內(nèi)涵篩選(high content screening, HCS)技術(shù),指在保持細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能完整性的前提下檢測(cè)被篩樣品,分析其對(duì)細(xì)胞形態(tài)、生長(zhǎng)、分化、遷移、凋亡、代謝途徑及信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等各個(gè)環(huán)節(jié)的影響,在單一實(shí)驗(yàn)中獲取大量與基因、蛋白及其他細(xì)胞成分相關(guān)的信息,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)化合物多靶點(diǎn)、多參數(shù)的同時(shí)檢測(cè),確定其生物活性和潛在毒性的過(guò)程。這種量化的方法適用于大規(guī)模藥物篩選、藥理毒理實(shí)驗(yàn)等等。以往在獲取細(xì)胞圖像時(shí),由于被測(cè)樣品量大,而顯微鏡檢測(cè)視野小、操作繁瑣,檢測(cè)一張96孔板需要幾個(gè)小時(shí)的時(shí)間,難以滿足實(shí)驗(yàn)需求。今天我們以24孔板為例為大家演示如何利用THUNDER實(shí)現(xiàn)高內(nèi)涵快速掃描成像。

         

         

         

         

        首先設(shè)定好紅綠雙色通道和曝光時(shí)間,選擇適合高內(nèi)涵快速成像的ICC THUNDER方法,然后進(jìn)入LAS X Navigator導(dǎo)航式界面。

         

        然后點(diǎn)擊carrier,去選擇對(duì)應(yīng)孔板的模具,那這邊我們選擇24孔板即可出現(xiàn)對(duì)應(yīng)畫(huà)面。

         

        那比如我們想在每個(gè)孔中做隨機(jī)10個(gè)點(diǎn)的多點(diǎn)掃描,點(diǎn)擊ok可出現(xiàn)10個(gè)位置固定的模式。

         

        那如果想要10個(gè)點(diǎn)的位置不一樣,我們可以勾選random,這樣10個(gè)點(diǎn)的位置是隨機(jī)的。

         

        此外,我們還可以調(diào)整點(diǎn)的分布,讓其更靠近中心或邊緣。比如,更靠中心一些,ok,那這樣可以看到10個(gè)點(diǎn)更聚集在孔的中央。

         

        或者,我們還可以進(jìn)行拼圖,比如,做一個(gè)5X5的拼圖,這樣可以看到每個(gè)孔中有一個(gè)5X5視野的拼圖。

         

        或者可以以孔的覆蓋度來(lái)進(jìn)行拼圖。比如我們選擇60%的覆蓋度,可以看到是這個(gè)樣子。

         

        這里以5X5拼圖為例,可以看到右下角24個(gè)孔拍完總共需要的時(shí)間和數(shù)據(jù)大小。

         

        設(shè)置完成后,點(diǎn)擊start進(jìn)行拍攝。拍攝完成之后,可通過(guò)鼠標(biāo)滾輪對(duì)每個(gè)孔的拼圖進(jìn)行放大查看,也可以對(duì)任意一個(gè)孔的圖像進(jìn)行查看。圖像清晰、無(wú)拼接痕跡。

         

        以上多孔板高內(nèi)涵快速成像的操作就完成了。

         

         

        在操作視頻里,我們可見(jiàn)THUNDER可隨心所欲地控制多孔板高內(nèi)涵快速成像;直觀又準(zhǔn)確無(wú)誤的操作讓您用非常少的投入便實(shí)現(xiàn)從圖像采集到創(chuàng)建報(bào)告;從此,您無(wú)需在學(xué)習(xí)軟件操作上花費(fèi)大量的精力,將更多的時(shí)間投入到研究中!

         

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